Рефераты

Биосинтез белков - (реферат)

Биосинтез белков - (реферат)

Дата добавления: март 2006г.

    Биосинтез белков

Каковы же основные формы связи аминокислот в сложной молекуле белка? Ещё в 1891 г. А. Я. Данилевский высказал предположение, что это амидные связи, образованные карбоксилом одной молекулы аминокислоты и аминогруппой другой (поликонденсация типа “голова– хвост”), например:

    -H2O
    H2N-CH2-C=O +HNHCH2COOH--а
    \
    OH
    а H2N-CH2-CO-NH-CH2-COOH
    (пептидная связь)

Амидные связи этого типа называются пептидными связями, а низкомолекулярные соединения, в которых аминокислоты соединены друг с другом пептидными связями, принято называть пептидами (или полипептидами).

Пептиды образуются при частичном гидролизе белков. Пептидная теория строения белка была развита Э. Фишером и Гофмейстером и в настоящее время окончательно подтверждена.

В зависимости от числа аминокислотных остатков, входящих в молекулу полипептида, различают дипептиды, трипептиды, тетрапептиды и т. д... Характерную для пептидов группировку

    -CO-NH- называют пептидной.

Названия полипептидов производят от названий остатков аминокислот, прореагировавших своими карбоксильными группами, и от названия аминокислоты, реагирующей своей аминогруппой и сохраняющей свободную карбоксильную группу:

    H2N-CH2-CO-NH-CH(CH3)-COOH
    глицилаланин(H-гли-ала-OH)
    NH2-CH(CH3)-CO-NH-NH2-CO-NH-CH2-COOH
    Аланилглицилглицин(H-ала-гли-гли-OH)

К настоящему времени разработано много методов превращения а-аминокислот в пептиды и синтезированы простейшие природные белки–инсулин, рибонуклеаза, вазопрессин, окситоцин и др. Для того чтобы соединить две аминокислоты пептидной связью, необходимо: а) закрыть (защитить) карбоксильную группу глицина и аминогруппу аланина, чтобы не произошло нежелательных реакций по этим группам; б) образовать пептидную связь; в) снять защитные группы. Защитные группы должны надёжно закрывать аминную и карбоксильную группы в процессе синтеза и потом легко сниматься без разрушения пептидной связи.

Защита аминогруппы наиболее просто проводится ацилированием:

    -HCl
    R-COCl+H2N-CH-COOH--аR-CO-NH-CH-COOH
    | |
    CH2 CH3

Карбоксильную группу для защиты превращают в сложноэфирную: -HOH

    H2N-CH2-COOH+HOR--а H2N-CH2-COOR

Для образования пептидной связи или активируют карбоксильную группу N-ацилаланина, превращая его в хлорангидрид, или проводят конденсацию в присутствии сильных водоотнимающих веществ (дициклогексилкарбодиимид, этоксиацетилен):

    -H2O
    R-CO-NH-CH-COOH+HNHCH2-COOR--а
    |
    CH3 гидролиз
    а R-CO-NH-CH-CO-NH-CH2-COOR----а
    |
    CH3
    а H2N-CH-CO-NH-CH2-COOH
    |
    CH3

Затем снимают защитные группы в таких условиях, чтобы не затрагивалась пептидная связь. Таким образом можно синтезировать не только ди-, но и три-, и тетрапептиды и т. д...

Очень перспективный метод синтеза пептидных связей предложил в 1960 г. Мерифильд (США). Этот метод потом получил названиетвёрдофазного синтеза пептидов. Первая аминокислота с защищённой аминогруппой присоединяется к твёрдому носителю– ионнообменной смоле, содержащей первоначально группы –CH2Cl (1-ая стадия), с образованием так называемой “якорной” связи, которая обозначена жирной линией: (1)-NaCl

Смола-CH2Cl+NaOOC-CHR-NHCOR’аСмола- -CH2O-C-CHR-NHCOR’аСмола-CH2O-C-CHR || ||

    O O
    +HOOC-CHR’’-NHOR(3)
    -NH2-----------аСмола-CH2O-C-CHR
    ||
    (4) O

-NHCO-CHR’’-NHCOR’аСмола-CH2O-C-CHR--NHCO-CHR’’-NH2 и т. д. || O

Затем наращивают пептидную цепь, пропуская через смолу растворы соответствующих реагентов. Для этого сначала убирают группу, защищающую конечную NH2–группу (2-ая стадия). Пропуская через смолу раствор другой аминокислоты с защищённой аминогруппой в присутствии водоотнимающих реагентов, образуют пептидную связь между первой и второй аминокислотой (3-я стадия). Если затем убрать защитную группу (4-ая стадия), синтез пептида можно вести далее. После наращивания пептидной цепи до нужной величины гидролизуют “якорную” сложноэфирную связь и смывают полипептид со смолы:

    HBr
    Смола-CH2O-CO-CHR-NH…CO-CHR’NH2---а
    аСмола-CH2OH+HOOCCHRNH…COCHR’NH2
    Полипептид

Метод Мерифильда прост в техническом оформлении, что позволяет полностью автоматизировать процесс. Поэтому, хотя вышеупомянутые белки инсулин(51 аминокислота) и рибонуклеаза(124 аминокислоты) были синтезированы классическими методами, метод Мерифильда позволяет значительно сократить затраты труда и времени на синтез белков. Так, рибонуклеаза была синтезирована Мерифильдом в 1968 г. менее чем за месяц, хотя синтез включал 369 последовательных реакций. Чеботарёв А. 11п1


© 2010 Современные рефераты